Ultra Nuclease GMP-grade
Kataloški broj: HC2016A
UltraNuclease GMP-grade se eksprimira i prečišćava u Escherichia coli (E.coli) genetičkim inženjeringom i priprema u GMP okruženjima.Može smanjiti viskozitet ćelijskog supernatanta i ćelijskog lizata u naučnim istraživanjima, povećati efikasnost prečišćavanja proteina i poboljšati funkcionalna istraživanja proteina.Proizvod također može smanjiti ostatke nukleinske kiseline domaćina do pg-grade, poboljšavajući performanse i sigurnost bioloških proizvoda primjene, uključujući pročišćavanje virusa, proizvodnju vakcina i proizvodnju proteina/polisaharida farmaceutskih proizvoda.Osim toga, proizvod se može primijeniti i za sprječavanje zgrušavanja mononuklearnih ćelija ljudske periferne krvi (PBMC) u ćelijskoj terapiji i razvoju vakcine.
UltraNuclease se isporučuje u obliku sterilizovanog reagensa, eluiranog u puferu (20mM Tris-HCL pH 8,0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glicerin), sa izgledom bezbojne, providne tečnosti.Ovaj proizvod je proizveden prema zahtjevima GMP procesa i isporučen je u tečnom obliku.
Komponente
UltraNuclease GMP-grade (250 U/μL)
Uslovi skladištenja
Proizvod se isporučuje sa suvim ledom i može se čuvati na -25℃~-15°C dve godine.
Ako je proizvod otvoren i čuvan na 4℃ duže od nedelju dana, preporučujemo filtriranjeproizvod za sprječavanje mikrobne kontaminacije.
Specifikacije
| Expression Host | Rekombinantna E. coli sa genom UltraNuclease |
| Molekularna težina | 26,5 kDa |
| soelektrična tačka | 6.85 |
| Čistoća | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Storage Buffer | 20 mM Tris-HCL pH 8,0, 2 mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glicerin |
|
Definicija jedinice | Definicija jedne jedinice aktivnosti (U) je količina enzima na koju se koristipromijenite vrijednost apsorpcije ΔA260 za 1,0 za 30 minuta u 2.625 mLreakcioni sistem na 37℃ sa pH od 8,0 (ekvivalentno potpunoj digestiji37 μg DNK sperme lososa u oligonukleotide). |
Instrukcije
1. Uzorak Kolekcija
Adherentne ćelije: uklonite medijum, operite ćelije sa PBS i uklonite supernatant.
Suspenzirane ćelije: sakupite ćelije centrifugiranjem, operite ćelije sa PBS, centrifugirajte na 6.000o/min 10 min, sakupiti pelet.
Escherichia coli: prikupiti bakterije centrifugiranjem, jednom isprati PBS, centrifugirati na 8000okretaja u minuti 5 min, i sakupite pelet.
2. Tretman uzorkom
Sakupljene ćelijske pelete tretirati puferom za lizu u omjeru mase(g) prema zapremini(mL)1:(10-20), ili mehaničkim ili hemijskim metodama na ledu ili na sobnoj temperaturi (1g ćelijskog peleta sadrži oko
109 ćelija).
3. Enzimski tretman
Dodajte 1-5 mM MgCl u reakcioni sistem i podesite pH na 8-9.
Dodajte UltraNuclease prema omjeru od 250 jedinica za varenje 1 g ćelijskih peleta, inkubirajte na 37 ℃ više od 30 minuta.Molimo pogledajte obrazac “Preporučeno vrijeme reakcije” da odaberetetrajanje tretmana.
4. Supernatant Kolekcija
Centrifugirajte na 12.000 o/min 30 minuta i sakupite supernatant.
Napomena: Ako je otopina kisela ili alkalna, ili sadrži visoke koncentracije soli, deterdženata ilidenaturanti, povećajte dozu enzima ili u skladu s tim produžite vrijeme tretmana.
Preporučeni uslovi reakcijeons
| Parametar | Optimalno stanje | Efikasan konditor |
| Mg²+Koncentracija | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Temperatura | 37℃ | 0-42℃ |
| DTT koncentracija | 0-100 mM | >0 mM |
| Koncentracija merkaptoetanola | 0-100 mM | >0 mM |
| Koncentracija monovalentnih katjona | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Koncentracija fosfata | 0-10 mM | 0-100 mM |
Preporučeno Reakcija Vrijeme (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Količina ultranukleaze (konačna koncentracija) | Vrijeme reakcije |
| 0,25 U/mL | >10 h |
| 2,5 U/mL | >4h |
| 25 U/mL | 30 min |
napomene:
Nosite neophodnu osobnu zaštitnu opremu, kao što je laboratorijski mantil i rukavice, kako biste osigurali svoje zdravlje i sigurnost!
