2×PCR Master Mix (bez boje)
PCR Master Mix je vrsta konvencionalnog PCR premiksanog rastvora koji je spreman za upotrebu, uključujući Taq DNK polimerazu, dNTP mix MgCl2 i optimizovani pufer.Tokom reakcije, samo prajmer i šablon se mogu dodati za amplifikaciju, što uveliko pojednostavljuje operativne korake eksperimenta.Ovaj proizvod sadrži odlične stabilizatore i može se čuvati 3 mjeseca na 4℃.PCR proizvod ima 3′-dA izbočinu i može se lako klonirati u T vektor.
Uslovi skladištenja
Proizvod treba čuvati na -25℃~ -15℃ dve godine.
Specifikacije
Fidelity (vs.Taq) | 1× |
Hot Start | No |
Overhang | 3′-A |
Polimeraza | Taq DNK polimeraza |
Reaction Format | SuperMix ili Master Mix |
Brzina reakcije | Standard |
vrsta proizvoda | PCR Master Mix (2×) |
Instrukcije
1.Reakcioni sistem
Komponente | Veličina (μL) |
Predložak DNK | Pogodno |
Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
PCR Master Mix | 25 |
ddH2O | Do 50 |
2.Amplification Protocol
Koraci ciklusa | temperatura (°C) | Vrijeme | Ciklusi |
Pre-denaturacija | 94 ℃ | 5mins | 1 |
Denaturacija | 94 ℃ | 30 sec | 35 |
Žarenje | 50-60 ℃ | 30 sec | |
Produžetak | 72 ℃ | 30-60sec/kb | |
Final Extension | 72 ℃ | 10mins | 1 |
napomene:
1) Upotreba šablona: 50-200 ng genomske DNK;0,1-10 ng plazmidne DNK.
2) Mg2+koncentracija: Ovaj proizvod sadrži 3 mM MgCl2 pogodnog za većinu PCR reakcija.
3) Temperatura žarenja: Molimo pogledajte teorijsku vrijednost Tm prajmera.Temperatura žarenja može se postaviti na 2-5 ℃ nižu od teorijske vrijednosti prajmera.
4) Vrijeme produženja: Za molekularnu identifikaciju preporučuje se 30 sec/kb.Za kloniranje gena, 60sec/kb se preporučuje.
Bilješke
1.Radi vaše sigurnosti i zdravlja, nosite laboratorijske mantile i jednokratne rukavice za rad.
2.Samo za istraživačku upotrebu!