One Step Fast RT-qPCR sonda Premix-UNG
Kataloški broj: HCR5143A
One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) je RT-qPCR komplet za brzu detekciju zasnovan na sondi pogodan za jednopleks ili multipleks kvantitativni PCR koristeći RNK kao šablon (kao što je RNA virus).Ovaj proizvod koristi novu generaciju Taq DNK polimeraze modificirane antitijelima i namjensku reverznu transkriptazu u jednom koraku, sa optimiziranim puferom za brzo amplifikaciju, koji ima bržu brzinu amplifikacije, veću efikasnost i specifičnost amplifikacije.Podržava uravnoteženo pojačanje iu singleplexu iu multipleksu uzoraka niske i visoke koncentracije u kratkom vremenu.
Komponente
1. 5×RT-qPCR pufer (U+)
2. Enzimska mješavina (U+)
napomene:
a.5×RT-qPCR pufer (U+) uključuje dNTP i Mg2+;
b.Enzimska mješavina (U+) uključuje reverznu transkriptazu, Hot Start Taq DNK polimerazu, inhibitor RNaze i UDG;
c.Koristite nastavke bez RNase, EP epruvete itd.
Prije upotrebe, temeljno promiješajte pufer 5×RT-qPCR (U+).Ako nakon odmrzavanja ima bilo kakvih taloga, pričekajte da se pufer vrati na sobnu temperaturu, promiješajte i otopite, a zatim ih normalno koristite.
Uslovi skladištenja
Proizvod se isporučuje sa suvim ledom i može se čuvati na -25~-15℃ 1 godinu.
Instrukcije
1. Reakcija Sistem
| Komponente | Zapremina (20 μL reakcija) |
| 2 ×RT-qPCR pufer | 4μL |
| Enzimska mješavina (U+) | 0.8μL |
| Primer Forward | 0.1~ 1.0μM |
| Primer Reverse | 0.1~ 1.0μM |
| TaqMan sonda | 0,05~0,25μM |
| Predložak | X μL |
| Voda bez RNaze | do 25μL |
Napomene: Reakcioni volumen je 10-50μL.
2. Protokol biciklizma (Sstandard)
| Ciklus korak | Temp. | Vrijeme | Ciklusi |
| Reverzna transkripcija | 55 ℃ | 10 min | 1 |
| Inicijalna denaturacija | 95 ℃ | 30 sec | 1 |
| Denaturacija | 95 ℃ | 10 sek | 45 |
| Žarenje/produženje | 60 ℃ | 30 sec |
| Cycling Protocol (brzo) Ciklus korak |
Temp. |
Vrijeme |
Ciklusi |
| Reverzna transkripcija | 55 ℃ | 5 min | 1 |
| Inicijalna denaturacija | 95 ℃ | 5 s | 1 |
| Denaturacija | 95 ℃ | 3 s | 43 |
| Žarenje/produženje | 60 ℃ | 10 s |
napomene:
a.Temperatura reverzne transkripcije je između 50 ℃ i 60 ℃, povećanje temperature pomaže da se pojačaju složene strukture i šabloni sa visokim sadržajem CG;
b.Optimalna temperatura žarenja treba se podesiti na osnovu Tm vrijednosti prajmera i odabrati najkraće vrijeme za prikupljanje fluorescentnog signala na osnovu PCR instrumenta u realnom vremenu.
Bilješke
Nosite neophodnu osobnu zaštitnu opremu, kao što je laboratorijski mantil i rukavice, kako biste osigurali svoje zdravlje i sigurnost!
