Komplet za ekstrakciju virusne DNK/RNA
Ovaj komplet je pogodan za brzu ekstrakciju virusne DNK/RNA visoke čistoće iz uzoraka kao što su nazofaringealni brisevi, brisevi okoline, supernatanti ćelijske kulture i supernatanti homogenata tkiva.Komplet je baziran na tehnologiji pročišćavanja membrane od silicijum dioksida koja eliminiše potrebu za korišćenjem organskih rastvarača fenola/hloroforma ili dugotrajne precipitacije alkohola za ekstrakciju virusne DNK/RNA visokog kvaliteta.Dobijene nukleinske kiseline su bez nečistoća i spremne su za upotrebu u nizvodnim eksperimentima kao što su reverzna transkripcija, PCR, RT-PCR, PCR u realnom vremenu, sekvenciranje sljedeće generacije (NGS) i Northern blot.
Uslovi skladištenja
Čuvati na 15 ~ 25 ℃, a transportovati na sobnoj temperaturi
Komponente
| Komponente | 100RXNS |
| Buffer VL | 50 ml |
| Buffer RW | 120 ml |
| ddH2 O bez RNaze | 6 ml |
| FastPure RNA kolone | 100 |
| Tube za sakupljanje (2ml) | 100 |
| Epruvete za sakupljanje bez RNaze (1 ,5 ml) | 100 |
Buffer VL:Obezbedite okruženje za lizu i vezivanje.
Buffer RW:Uklonite zaostale proteine i druge nečistoće.
ddH2O bez RNaze:Eluirati DNK/RNA sa membrane u spin koloni.
FastPure RNA kolone:Konkretno adsorbuju DNK/RNA.
Tube za sakupljanje 2 ml:Sakupiti filtrat.
Epruvete za sakupljanje bez RNaze 1,5 ml:Sakupite DNK/RNA.
Prijave
Brisevi nazofarinksa, brisevi okoline, supernatanti ćelijske kulture i supernatanti homogenata tkiva.
Samospremni Materials
Vrhovi pipeta bez RNaze, 1,5 ml epruvete za centrifugiranje bez RNaze, centrifuga, vorteks mikser i pipete.
Proces eksperimentiranja
Izvršite sve sljedeće korake u biološkom ormaru.
1. Dodati 200 μl uzorka u epruvetu za centrifugiranje bez RNaze (nadoknaditi sa PBS ili 0,9% NaCl u slučaju nedovoljnog uzorka), dodati 500 μl pufera VL, dobro promiješati vorteksiranjem 15 – 30 sekundi i centrifugirati kratko da sakupite smjesu na dnu epruvete.
2. Stavite FastPure RNA kolone u epruvete za sakupljanje od 2 ml.Prenesite smjesu iz koraka 1 u FastPure RNA kolone, centrifugirajte na 12.000 rpm (13.400 × g) 1 min i bacite filtrat.
3. Dodajte 600 μl pufera RW u FastPure RNA kolone, centrifugirajte na 12.000 rpm (13.400 × g) 30 sekundi i bacite filtrat.
4. Ponovite korak 3.
5. Centrifugirajte praznu kolonu na 12.000 o/min (13.400 × g) 2 min.
6. Pažljivo prebacite FastPure RNK kolone u nove epruvete za sakupljanje bez RNaze od 1,5 ml (isporučene u kompletu) i dodajte 30 – 50 μl ddH2O bez RNaze u centar membrane bez dodirivanja kolone.Ostavite da odstoji na sobnoj temperaturi 1 min i centrifugirajte na 12.000 o/min (13.400 × g) 1 min.
7. Odbacite FastPure RNA kolone.DNK/RNA se može koristiti direktno za naredne analize, ili se može čuvati na -30~ -15°C u kratkom periodu ili -85 ~-65°C na duži period.
Bilješke
Samo za istraživačku upotrebu.Nije za upotrebu u dijagnostičkim procedurama.
1. Uravnotežite uzorke na sobnu temperaturu unaprijed.
2. Virusi su veoma zarazni.Uvjerite se da su poduzete sve potrebne sigurnosne mjere prije eksperimenta.
3. Izbjegavajte ponovno zamrzavanje i odmrzavanje uzorka, jer to može dovesti do razgradnje ili smanjenog prinosa ekstrahirane virusne DNK/RNA.
4. Oprema koja se samostalno priprema uključuje vrhove za pipete bez RNaze, epruvete za centrifugiranje bez RNaze, centrifugu, vorteks mikser i pipete.
5. Kada koristite komplet, nosite laboratorijski mantil, jednokratne rukavice od lateksa i jednokratnu masku i koristite potrošni materijal bez RNase kako biste smanjili rizik od kontaminacije RNase.
6. Izvedite sve korake na sobnoj temperaturi osim ako nije drugačije naznačeno.
Mehanizam i tok rada
