alkalna fosfataza (ALP)
Opis
Alkalna fosfataza je izvedena iz rekombinantnog soja E. coli koji nosi gen TAB5.Enzim katalizira defosforilaciju 5´ i 3´ krajeva DNK i RNK fosfomonoestera.Takođe, hidrolizuje ribozu, kao i deoksiribonukleozid trifosfate (NTP i dNTP).TAB5 alkalna fosfataza djeluje na 5´ izbočene, 5´ udubljene i tupe krajeve.Fosfataza se može koristiti u mnogim aplikacijama molekularne biologije, kao što je kloniranje ili označavanje kraja sonde za uklanjanje fosforiliranih krajeva DNK ili RNK.U eksperimentima kloniranja, defosforilacija sprječava lineariziranu plazmidnu DNK od samoligiranja.Također može razgraditi neinkorporirane dNTP u PCR reakcijama kako bi pripremio šablon za sekvenciranje DNK.Enzim se potpuno i nepovratno inaktivira zagrijavanjem na 70°C u trajanju od 5 minuta, čime uklanjanje fosfataze prije podvezivanja ili označavanja kraja postaje nepotrebno.
Upotreba
1.Alkalna fosfataza spojena sa proteinima (antitijela, streptavidin itd.) može specifično identificirati ciljne molekule i može se koristiti u ELISA, WB i histohemijskoj detekciji;
2. Alkalna fosfataza se može koristiti za defosforizaciju 5'-terminala DNK ili RNK kako bi se spriječilo samovezivanje;
3. Gore navedena defosforilirana DNK ili RNA može se označiti radio-obilježenim fosfatima (preko T4 poli-nukleotid kinaze)
Hemijska struktura
Specifikacija
| Test Items | Specifikacije |
| Enzimska aktivnost | 5U/μL |
| Aktivnost endonukleaze | Nije detektovano |
| Aktivnost egzonukleaze | Nije detektovano |
| Nicking Activity | Nije detektovano |
| Aktivnost RNase | Nije detektovano |
| E.coli DNK | ≤1copy/5U |
| Endotoksin | LAL-test, ≤10EU/mg |
| Čistoća | ≥95% |
Transport i skladištenje
Prijevoz:AmbIent
Skladištenje:Čuvati na 2-8°C
Preporučeno ponovno testiranježivot:2 godine
