Dnaza I

Dnaza I (deoksiribonukleaza I) je endodeoksiribonukleaza koja može probaviti jednolančanu ili dvolančanu DNK.Prepoznaje i cijepa fosfodiestarske veze kako bi proizveo monodeoksinukleotide ili jednolančane ili dvolančane oligodeoksinukleotide s fosfatnim grupama na 5′-terminalu i hidroksil na 3′-terminalu.Aktivnost DNaze I zavisi od Ca2+ i može se aktivirati jonima dvovalentnih metala kao što su Mn2+ i Zn2+.5mM Ca2+ štiti enzim od hidrolize.U prisustvu Mg2+, enzim bi mogao nasumično prepoznati i odcijepiti bilo koje mjesto na bilo kojem lancu DNK.U prisustvu Mn2+, dvostruki lanci DNK mogu se istovremeno prepoznati i pocijepati na gotovo istom mjestu kako bi se formirali ravni kraji DNK fragmenti ili ljepljivi krajnji DNK fragmenti sa 1-2 nukleotida koji vire.

Product Property

Dnaza I goveđe pankreasa je eksprimirana u sistemu ekspresije kvasca i pročišćena.

Ckomponente

Transport i skladištenje

1. Stabilnost skladištenja: – 15℃~-25℃ za skladištenje;

2.Transport Stabilnost: Transport ispod leda;

3. Isporučuje se u: 10 mM Tris-HCl, 2 mM CaCl₂, 50% glicerol, pH 7,6 na 25℃.

Definicija jedinice

Jedna jedinica je definirana kao količina enzima koja će potpuno razgraditi 1 µg pBR322 DNK za 10 minuta na 37°C.

Kontrola kvaliteta

RNase:5U DNaze I sa 1,6 μg MS2 RNK tokom 4 sata na 37 ℃ ne daje degradaciju kao što je utvrđeno elektroforezom u agaroznom gelu.

Bakterijski endotoksin:LAL-test, prema Kineskoj farmakopeji IV izdanje 2020., metoda ispitivanja ograničenja gela, opće pravilo (1143).Sadržaj bakterijskog endotoksina bi trebao biti ≤10 EU/mg.

Uputstvo za upotrebu

1. Pripremite reakcionu otopinu u epruveti bez RNaze prema dolje navedenim proporcijama:

2,37 ℃ tokom 15 minuta;

3. Dodajte pufer za terminaciju da zaustavite reakciju i zagrevajte na 65℃ 10 minuta da inaktivirate DNazu I. Uzorak se može direktno koristiti za sledeći eksperiment transkripcije.

Bilješke

1.Koristite 1U DNazu I po μg RNK, ili 1U DNazu I za manje od 1μg RNK.

2.EDTA treba dodati do konačne koncentracije od 5 mM kako bi se RNK zaštitila od razgradnje tokom inaktivacije enzima.